| Le cerveau a longtemps ete considere comme un organe immunoprivilegie. Ce temps est revolu, et il est reconnu aujourd'hui qu'il comporte un systeme de defense privilegie avec la barriere hematoencephalique et la cellule microgliale. Celle-ci est la principale responsable de la neuroinflammation. De type aigu, cette inflammation sera benefique. Par contre, de maniere chronique, elle sera nefaste pour l'hote. En effet, la microglie peut produire et secreter une panoplie de facteurs inflammatoires tels les cytokines et plusieurs radicaux libres. Ces facteurs provoquent un etat de stress oxydant chez les cellules environnantes. Les phenomenes de neuroinflammation et de stress oxydant representent des causes suspectees d'etre impliquees dans la maladie de Parkinson. Le but de mon projet etait d'abord de determiner et de comparer le potentiel inflammatoire du 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP+), du paraquat (PQ) et du lipopolysaccharide (LPS), afin d'etablir un bon modele d'etude de la neuroinflammation. En second lieu, j'ai evalue le potentiel anti-inflammatoire de deux molecules naturelles, la quercetine et la sesamine, deja reconnues pour leurs bonnes capacites protectrices. Finalement, ces molecules ont ete evaluees dans une coculture microgliale N9 -- neuronale PC12 pour verifier leur capacite a diminuer la mortalite neuronale inflammatoire. Le potentiel neuroinflammatoire des trois toxines au niveau des microglies N9 a ete evalue selon deux parametres : la transcription de la cytokine IL-6 par RT-qPCR et l'expression de l'enzyme iNOS par immunobuvardage de type " Western ". Ensuite, l'effet de la quercetine et de la sesamine, en pretraitement, a ete determine sur ces memes parametres. Les resultats ont demontre par chacune des trois toxines, chez la cellule N9, une augmentation dans la transcription d'IL-6 et celle-ci etait diminuee grace aux deux molecules naturelles. Pour ce qui est d'iNOS, son expression etait augmentee par le LPS et le PQ. Cette hausse a pu etre diminuee par les deux molecules d'interet. Le pretraitement a diminue la mortalite neuronale induite par l'activation microgliale, confirmee par le dosage de la cytokine IL-6. De plus, un marquage positif au TUNEL nous suggere une mortalite apoptotique. Ces resultats me permettent de conclure que les trois toxines induisent une activation microgliale, laquelle est diminuee par un pretraitement avec la quercetine et la sesamine. Ces molecules possedent donc de bonnes capacites anti-inflammatoires. Ainsi, elles sont prometteuses comme molecules " sante " facilement integrables a l'alimentation quotidienne et pourraient constituer une interessante approche preventive aux maladies neurodegeneratives telle que la MP.;Mots cles : Neuroinflammation, Neuroprotection, Parkinson, Quercetine, Sesamine, Cytokine, IL-6, iNOS, RT-qPCR, Coculture. |
