Resistance cellulaire au topotecan

Il a ete demontre dans plusieurs modeles experimentaux que le niveau cellulaire de la topoisomerase I correle avec la sensibilite des cellules aux derives de la camptothecine, tel que le topotecan. Cependant, malgre l'interet clinique de ces drogues dans le traitement chimiotherapeutique du cancer ovarien, une relation similaire n'a pas ete etablie dans les lignees cellulaires de carcinomes ovariens. Par consequent, pour justifier l'importance du statut de la topoisomerase I dans l'alternative chimiotherapeutique utilisant les derives de la camptothecine, nous avons verifie si le niveau de la topoisomerase I correle effectivement avec la sensibilite de ces cellules au topotecan. Pour se faire, nous avons tente de surexprimer la proteine dans la lignee OVCAR-3 avec differents systemes d'expression eucaryotes et nous avons choisi d'utiliser le systeme d'infection adenovirale AdEasy(TM). Bien que nous ayons ete en mesure d'augmenter significativement le niveau de la topoisomerase I, les resultats demontrent que la sensibilite de ces cellules a la drogue n'est pas accrue contrairement a ce qui est decrit dans la litterature pour des lignees d'origine tissulaire differente. Pour expliquer ce resultat, nous nous sommes interesses a l'etat de phosphorylation de la proteine puisque l'activite de l'enzyme est fortement dependante de son statut de phosphorylation. Ainsi, nous demontrons que la topoisomerase I exogene est phosphorylee differemment par rapport a la proteine endogene.;Les resultats de ces travaux constituent donc la premiere demonstration in vivo que l'augmentation de la quantite de la topoisomerase 1 n'entraine pas une resistance cellulaire accrue au topotecan etant donnee la diminution de la phosphorylation de la proteine. Ce resultat confirme que la phosphorylation joue un role critique dans la regulation cellulaire de l'activite de l'enzyme.