Caracterisation de TReP-132, un nouveau facteur de transcription regulant la steroidogenese (French and English text)

La synthese des hormones steroidiennes est catalysee par differentes enzymes, dont les niveaux d'expression relatifs varient selon l'espece, le stade de developpement et le type de tissu. L'expression de ces enzymes est regulee par plusieurs hormones peptidiques et par l'augmentation consequente de l'AMPc ou de Ca +2. Elle est egalement induite en reponse a l'expression du recepteur nucleaire orphelin "steroidogenic factor-1" (SF-1). La premiere enzyme de cette voie de synthese est le cytochrome P450scc, qui catalyse la formation de la pregnenolone a partir du cholesterol. Le promoteur du gene codant pour cette enzyme contient une region (entre les nucleotides -155 et -131) specifiquement active dans les cellules steroidogeniques et particulierement la lignee tumorale JEG-3 provenant de placenta humain. Cet element -155/-131 ne possede pas de site de liaison a SF-1, mais lie specifiquement plusieurs complexes proteiques. Afin d'isoler des proteines appartenant a ces complexes, un criblage d'une banque d'ADNc placentaire a ete realise en utilisant cette region promotrice comme sonde. Il a permis d'isoler un nouveau facteur de transcription que nous avons nomme "transcriptional regulating protein of 132 kDa" (TReP-132). L'expression de TReP-132 induit l'activite trans-activatrice de la region -155/-131 dans differentes lignees de cellules steroidogeniques, dans le contexte du promoteur de P450sec ou lorsqu'elle est clonee en amont d'un promoteur minimal. Nous avons par ailleurs montre que dans la lignee de cellules de surrenales humaines NCI-H295, TReP-132 forme un complexe avec SF-1 et le coactivateur general p300 pour induire l'expression de P450scc. Ces donnees suggerent que TReP-132 pourrait jouer un role important dans la modulation des fonctions physiologiques de SF-1. En dernier lieu, nous avons montre que l'expression de TReP-132 induit---au niveau basal et en synergie avec l'AMPc---les voies de synthese presentes dans les zones fasciculee et reticulee des surrenales qui produisent les glucocorticoides et le DHEA. L'ensemble de nos resultats indique que nous avons isole un nouveau facteur de transcription implique avec SF-1 et l'AMPc dans la regulation des fonctions steroidiennes.