Etude de la regulation du gene de la metallothioneine-I de la souris: Caracterisation, purification du facteur MEP-1 et mise en evidence de nouveaux sites d'interaction proteine-ADN

Le processus d'induction par les ions de metaux lourds des genes codant pour les metallothioneines (MT) de mammiferes est dependant de courtes sequences nucleotidiques (MRE) localisees en amont de ces genes, et de facteurs de regulation interagissant avec ces MRE. Le but global de l'etude etait de caracteriser et de purifier l'un de ces facteurs: MEP-1. Il a ete determine que ce facteur nucleaire murin de 108 kDa est capable de lier avec differents degres d'affinite les MRE des genes MT. Cette propriete de MEP-1 a ete expioitee pour sa purification a homogeneite. Des etudes de liaison effectuees avec la proteine purifiee indiquent qu'elle interagit specifiquement avec les MRE et ce, de facon dependante de la presence du zinc. Enfin, des analyses in vitro au moyen d'essais de protection a la DNase I ont permis de detecter deux nouveaux sites d'interaction sur le promoteur du gene MT-I de la souris, soit MREcl et MIS.