Etude du recrutement des complexes de remodelage de la chromatine chez la levure Saccharomyces cerevisiae

La transcription des genes est un processus finement regule. Les composantes de la chromatine, les complexes de remodelage de la chromatine ainsi que la machinerie transcriptionnelle elle-meme sont directement impliques dans cette regulation. Dans le cadre des travaux de doctorat presentes ici, j'ai etudie les implications et les interrelations entre ces diverses proteines qui regulent l'expression des genes. J'ai donc utilise l'immunoprecipitation de la chromatine (ChIP) pour etudier le recrutement des complexes de remodelage et de la machinerie transcriptionnelle lors de l'activation du gene modele GAL1 chez la levure Saccharomyces cerevisiae..;Dans un deuxieme temps, ces travaux ont permis de mettre en evidence les differents impacts de deux composantes chromatimennes specialisees, soit la variante d'histone H2A.Z et la proteine HMG Nhp6a/b. J'ai demontre le role crucial de la variante d'histone H2A.Z pour le recrutement des complexes de remodelage au promoteur du gene GAL1. En absence de H2A.Z, le recrutement du Mediateur, de SAGA ainsi que de Swi/Snf est grandement affecte ou aboli meme si l'activateur Gal4 est toujours en mesure de se lier a l'UASG. Une precedente etude dans le laboratoire avait demontre que le recrutement de TBP et de l'ARN polymerase II est egalement diminue dans le mutant Deltahtz1. Ces resultats suggerent que la variante d'histone H2A.Z cree une structure chromatinienne specialisee requise pour l'assemblage du complexe de pre-initiation de la transcription. Au contraire, la proteine HMG Nhp6a/b ne semble pas directement impliquee dans la regulation de la transcription, du moins au gene GAL1..;En somme, la regulation de l'expression du gene GAL1 necessite donc la coordination d'une panoplie de proteines impliquees dans l'integration du signal inducteur, le remodelage de la chromatine et la synthese de l'ARNm.;Dans un premier temps, mes travaux ont demontre que le complexe ATP-dependant Swi/Snf est recrute a l'UAS G des genes GAL1 et GAL7 suite a l'induction au galactose. De plus, l'activateur Gal4 n'est pas suffisant pour assurer le recrutement de Swi/Snf. Les interactions de Swi/Snf avec le Mediateur, les TAFII, et l'ARN polymerase II sont aussi importantes et suffisantes pour permettre le recrutement de Swi/Snf. Au contraire, l'acetylation de l'histone H3 par Gcn5 et le complexe SAGA ne sont pas requis pour recruter ou maintenir le complexe Swi/Snf a GAL1..