Developpement et application d'un test ELISA pour l'etude des anticorps diriges contre Clostridium difficil

Clostridium difficile est un pathogene enterique pouvant causer des diarrhees allant de moderees a severes, des colites pseudomembraneuses et meme la mort. Les traitements actuels contre la bacterie ont des taux de rechutes eleves. De plus, il n'existe pas a ce jour de vaccin permettant de prevenir l'infection. Cette etude epidemiologique porte sur la protection contre la colonisation et/ou la maladie conferee par la presence d'anticorps seriques naturels specifiques aux antigenes de la bacterie. Nous avons developpe un test ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) pour la detection des anticorps contre les toxines A et B de C. difficile et contre les proteines du flagelle (flagellines) dans des echantillons de serum. Notre test ELISA servant a detecter les anticorps diriges contre la toxine B a ete calibre de facon a obtenir la meilleure correlation possible avec le test de neutralisation de la cytotoxicite de la toxine B. Les parametres du test ELISA ainsi mis au point ont ete appliques aux autres antigenes (toxine A et flagellines), pour lesquels un test de reference n'existe pas.;Par la suite, nous avons tente de definir le role de la reponse immunitaire humorale de l'hote en correlant les resultats de l'analyse des serums de deux groupes de patients hospitalises avec les informations sur le suivi des symptomes et la recherche de la presence de la bacterie dans les selles. Le premier groupe de patients nous a permis d'etudier la relation entre la survenue de la colonisation ou de l'infection par C. difficile et la production d'anticorps. Nos resultats montrent que les anticorps seriques ne semblent pas proteger le patient de l'implantation de la bacterie au tube digestif mais que suite a l'infection, une reponse humorale est mise en place contre les toxines du pathogene. Les patients du deuxieme groupe, des patients hospitalises infectes par C. difficile, ont ete surveilles pour la survenue de symptomes severes, du deces ou de rechutes suite a un episode de maladie. Nous avons observe une plus grande prevalence d'anticorps seriques diriges contre la toxine B et contre certaines flagellines chez les patients ayant eu une infection simple, sans complications ni rechutes.;Les resultats de nos travaux indiquent donc que certains patients developpent une reponse humorale contre les antigenes de C. difficile et que les anticorps produits, particulierement ceux diriges contre la toxine B, semblent impliques dans la defense du patient contre la survenue de complications et de rechutes. Nos donnees laissent toutefois sous-entendre que d'autres caracteristiques de l'hote contribuent de facon importante a la defense contre la colonisation et l'infection par C. difficile. Des travaux supplementaires sont necessaires afin de definir les parametres qui permettront d'elaborer un protocole de vaccination optimal contre C. difficile..;Mots Cles. Clostridium difficile, ELISA, toxines, reponse humorale, protection.